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马尔尼菲篮状菌的实验室检查与注意事项!

2021-06-15作者:百欧博伟浏览次数:633  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

马尔尼菲篮状菌的实验室检查与注意事项!


马尔尼菲篮状菌Talaromyces marneffei)是篮状菌属中的一种。虽然大部分的篮状菌都不会引发人类的健康问题,但是马尔尼菲篮状菌却是致病的。此菌在自然界中广泛存在,其中广西银杏竹鼠的带菌率高达96%。


一、菌种简介

平台编号:bio-10002

规格:冻干物

拉丁属名:Talaromyces marneffei

中文译名:马尔尼菲篮状菌

拉丁学名:Talaromyces marneffei

界:真菌界

门:子囊菌

亚门:盘菌亚门

纲:散囊菌纲

目:散囊菌目

科:发菌科

属:篮状菌属

原始编号:C12972

菌株来源:←中国科学院微生物研究所←北京大学医学部皮肤科

保藏人:王龙

直接来源国家:中国

保藏时间:5/23/2001

其他保藏编号

生物危害:三类

模式菌株:非模式菌株

菌株用途:研究

培养温度:28℃

培养基:0013

提供形式:冻干物

储存条件:冻干菌种和试管斜面请置于 6-10℃冷藏。

注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。


二、生物特性

马尔尼菲篮状菌Talaromyces marneffei)是篮状菌属中的一种。虽然大部分的篮状菌都不会引发人类的健康问题,但是马尔尼菲篮状菌却是致病的。


三、培养条件

麦芽汁琼脂 I

12 Brix.麦芽汁 1.0 L 琼脂 15.0 g 自然 PH

13 号培养基或用下列培养基代替

葡萄糖 1% 蛋白胨 1% 酵母提取物 0.5% 琼脂 2%


四、临床表现

马尔尼菲篮状菌感染分为局限型感染和播散型感染,局限型感染病灶常局限在肺部或皮肤、淋巴结,此为病原菌入侵部位,血培养则阴性;而播散型感染则致死率高。患者早期主要表现为反复发热(HIV阳性人群常表现为持续性发热,而HIV阴性人群常表现为间歇性发热)、咳嗽、咳痰、消瘦、贫血等不典型症状。如果感染进展,该菌会经淋巴或血行播散到人体体内的各器官,引起皮肤、大脑、骨髓、内脏等脓肿样病灶。

1、呼吸系统:肺部通常被认为是该菌入侵的门户,是最早受累器官,可以累及肺部、支气管和胸膜。病人多表现为咳嗽、咳痰、咯血、胸痛,听诊呼吸音减弱、呼吸音粗、可闻及湿啰音及胸膜摩擦音,肺 CT 类似于肺炎、肺结核或肺脓肿病变,肺内多发大小不等的结节状浸润灶、局限性肺实变影、多发磨玻璃样密度影(ground glass opacity,GGO)、弥漫性粟粒样结节、可形成空洞或囊肿等改变,可伴肺门或纵隔淋巴结增大、胸腔积液。支气管病变者气管镜下可表现为支气管黏膜下息肉样结节。胸膜病变者胸腔镜下表现为胸膜黏连,脏壁层胸膜可见小结节。

2、消化系统:出现腹痛、腹泻、脓血便、肝脾大、肝脓肿、肝功能异常、多发性脾梗死、腹腔积液。累及食管时出现吞咽时胸骨后疼痛,影响患者进食,严重者无法饮水。

3、皮肤粘膜损害:多数患者出现多发性丘疹样皮损或皮下脓肿,往往是播散性病例的早期表现,好发于面部、躯干及上肢,表现为结节、坏死性丘疹、传染性软疣样丘疹、痤疮样损害、毛囊炎、脓疱疮、皮下脓肿及溃疡,其中坏死性丘疹是马尔尼菲篮状菌病最常见的皮肤损害(占70%),尤其常见于HIV阳性人群,丘疹中央发生坏死,坏死处凹陷呈脐窝状。HIV阴性人群常表现为多发性皮下结节或脓肿。病变波及口咽部时口腔疼痛,口咽部、上颚粘膜表面亦可见坏死性丘疹。

4、骨关节病变:骨骼可出现溶骨性骨损害,x线检查骨密度下降、虫蚀性溶骨性破坏、有骨膜反应、骨髓炎及骨质增生,骨ECT提示病灶处骨放射性浓聚。骨关节病变在艾滋病病人很少发生。

5、其他:全身淋巴结炎,泌尿系感染,中枢神经系统病肉芽肿或脓肿样病变等。


五、实验室检查

1、直接镜检或培养:取骨髓涂片、肺组织活检标本、皮肤渗液压片、肠粘膜活检组织、网膜活检组织、淋巴结活检组织,行过碘酸染色(PAS)、瑞氏染色或六胺银染色后镜检,或做真菌培养,HIV阳性人群血培养阳性率高于HIV阴性人群(76.7% VS 47.1%),真菌培养阳性是诊断的“金标准”,培养时间可延长至7-10天。

2、免疫学或分子生物学检测:HIV阳性人群通常具有高水平马尔尼菲篮状菌抗原与低水平抗体。ELISA法对外周血进行马尔尼菲篮状菌细胞壁甘露糖蛋白MP1P抗原检测,间接免疫荧光法对外周血检测马尔尼菲篮状菌特异性抗体;也可采用斑点印迹ELISA(dot blot ELISA)或乳胶凝集试验、侧流免疫层析法(ICT)检测尿液中TM抗原。病灶处标本行PCR或NGS测序。

3、其他:HIV阳性人群血白细胞通常不高或降低,并伴有贫血、血小板减少,部分病人可出现噬血细胞综合征,这可能与马尔尼菲篮状菌在病灶处主要存在于巨噬细胞内,巨噬细胞易于被活化并引起炎症因子瀑布有关。HIV阴性人群血白细胞通常升高,CD4+T淋巴细胞与血小板也可升高。


六、注意事项

1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。

2、菌种恢复培养前,建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,如在说明建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成,有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。

3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。

4、恢复培养厌氧菌时,在操作过程中应严格控制厌氧条件:制作培养基时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气,使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、与菌种相关的其它信息请参阅中国微生物菌种查询网网站


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