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DMEM低糖培养基的应用与知识解析!

2021-04-07作者:百欧博伟浏览次数:247  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

DMEM低糖培养基的应用与知识解析!


一、背景


DMEM低糖培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。


DMEMdulbecco's modified eagle medium的缩写,所以其特点主要包括以下:(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;3)含有糖酵解途径中的重要物质--丙酮酸;(4)含有微量的铁离子。



DMEM培养基主要有以下用途:用于成纤维细胞、神经元细胞、内皮细胞、杂交瘤细胞(SP2/0)、表皮喉癌细胞(HEP-2)、Hela(宫颈癌细胞)、CHO(中国仓鼠卵巢细胞)等细胞的培养,用于疫苗企业病毒株的传代培养供后续抗原的制备,用作动物疫病病毒采样及病毒分离和维持液的基础液、免疫治疗用细胞培养基础液以及人/禽流感病毒分离用生长液及维持液的基础液。


二、应用


用于红景天苷对高糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用研究:


探讨红景天苷对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用。


方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株贴壁后,以MTS法观察不同葡萄糖浓度对人脐静脉内皮细胞的细胞活力影响,根据结果选择糖浓度5.5mmol/L作为正常对照组,糖浓度45mmol/L组作为模型损伤组。


MTS法观察不同红景天苷浓度对正常培养的人脐静脉内皮细胞活力的影响;不同剂量红景天苷作用于高糖损伤的人脐静脉内皮细胞组,分组为正常对照组、模型损伤组、红景天苷不同剂量组(低剂量组、中剂量组、高剂量组、极高剂量组),通过MTS法检测细胞活力、WST-1法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法测定细胞内丙二醛(MDA)含量来评估红景天苷对高糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。


结果:不同红景天苷浓度培养的正常人脐静脉内皮细胞差异无统计学意义(24 h F=0.220,p=0.93;48 h F=0.106,p=0.98)。与模型损伤组比较,细胞培养24 h、48h,红景天苷中剂量组、高剂量组、极高剂量组细胞活力均明显增加(P<0.05)。细胞内MDA含量均明显下降(P<0.05),细胞内SOD活力均明显增加(P<0.05);红景天苷低剂量组4 8h细胞活力高于模型损伤组(P<0.05),细胞内MDA含量下降(P<0.05)。


结论:


1、糖浓度45mmol/L可以作为高糖损伤HUVEC的糖浓度;高糖可以降低HUVEC的细胞活性,该损伤作用是通过抑制HUVEC的SOD活性,增高HUVEC的MDA含量来实现的。


2、红景天苷可以恢复高糖损伤的HUVEC细胞活力,为细胞提供保护作用。该保护作用是通过增强高糖损伤的HUVEC的SOD活性,降低高糖损伤的HUVEC的MDA含量实现。


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